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培养基1

LiveRSup 新型小鼠原代肝细胞体外长期培养基

货号:M3C-01
规格:500ML
相关应用:小鼠原代肝实质细胞在体外的长期培养及功能维持
 
产品描述
本培养基含有小鼠肝实质细胞体外培养所需的所有营养成分,无需其他添加剂。能够支持新鲜小鼠原代肝细胞长达一个月以上的培养,阻止肝细胞的退分化和EMT,维持肝细胞关键转录因子和功能基因表达。
 
适用范围
本产品作为原代小鼠肝细胞培养基,可用于新鲜分离的小鼠肝细胞或通过化学重编程获得的小鼠肝实质样细胞。
 
【注】本产品不支持人肝细胞的长期培养。
 
保存条件
基础培养基:4
保质期:3个月

 

使用方法:

(1) 日常4℃保存(3个月内使用完毕),使用前预热至37℃。

(2) 细胞铺板前一天,使用康宁 Rat Tail Collagen I 对细胞培养皿进行包被,4℃过夜。

(3) 回收胶原,使用PBS清洗3遍培养皿。

(4) 将新鲜分离的小鼠肝细胞种板至胶原包被的细胞培养板(96/24/12/6 孔板)中。种板密度应为1×105-3×105/cm2,种板培养基为含有10%牛血清的高糖DMEM,在37℃, 5%CO2培养箱中进行培养。6小时后,待细胞完全贴壁,轻轻吸掉种板所用的培养基,更换为本培养基后放回原培养箱继续进行培养。

(5) 每三天更换一次细胞培养基,细胞形态饱满,呈现清晰的典型小鼠肝细胞多角型形态,取细胞进行计数、免疫荧光染色和 RT-qPCR 鉴定,用于开展肝细胞加药测试等。

 

注意事项:

1.实验操作应严格按照说明书进行,避免反复冻融。
2.原代小鼠肝细胞的分离和复苏过程及所使用的试剂需参考相关文献报道及细胞供应商。