LiveRSup 新型人原代肝细胞体外基础培养套装

产品描述:

本培养基含有人肝实质细胞体外培养所需的所有营养成分，无需其他添加剂，无血清，无生长因子，无细胞因子。能够支持新鲜或冻存的人原代肝细胞在体外的基本培养，且维持肝细胞典型多角型形态。

适用范围:

本产品作为原代人肝细胞培养基，既可用于新鲜分离的人肝细胞，也适用于冻存后复苏的人肝细胞，并在培养中维持人原代肝细胞的形态、部分关键基因表达、分泌、代谢和CYP酶活功能。

【注】本产品不支持小鼠肝细胞的培养。

培养基组成：

添加剂      规格 10 ML

基础培养基   规格 500 ML

添加剂使用比例  1：50

保存条件：

添加剂：-20℃    

基础培养基：4℃

有效期：一年

使用方法：

（1）将10mL添加剂与500mL基础培养基混匀后即可使用，日常4℃保存（1-2个月内使用完毕），使用前预热至37℃。

（2）细胞铺板前一天，使用康宁Rat Tail Collagen I对细胞培养皿进行包被，4℃过夜。

（3）回收胶原，使用PBS清洗3遍培养皿。

（4）将冻存人原代肝细胞或新鲜分离的人肝细胞种板至胶原包被的细胞培养板（96/24/12/6孔板）中，种板密度应为1×105-3×105/cm2，在37℃，5%CO2培养箱中进行培养。6小时后细胞完全贴壁，轻轻吸掉种板所用的培养基，更换为本培养基后放回原培养箱继续进行培养。

（5）每三天更换一次细胞培养基，第18天左右细胞生长达到稳定时期，细胞形态饱满，呈现清晰的典型人肝细胞多角型形态，取细胞进行计数、免疫荧光染色和RT-qPCR鉴定，用于开展肝脏体外模型的建立或加药测试等。

注意事项：

1．实验操作应严格按照说明书进行。

2．原代人肝细胞的分离和复苏过程及所使用的试剂需参考相关文献报道及细胞供应商。